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蘇木精(hematoxylin)和伊紅(eosin)染色方法,簡稱HE染色方法,是細胞與組織學最廣泛的染色方法。

一、HE 染色的基本原理

(一)細胞核染色的原理

細胞核內(nèi)的染色質(zhì)主要是去氧核糖核酸(DNA),DNA 的雙螺旋結構中,兩邊鏈上的磷酸基向外,帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。

(二)細胞漿染色的原理

細胞漿內(nèi)主要成分是蛋白質(zhì),為兩性化合物、細胞漿的染色與pH值有密切關系,當pH調(diào)到蛋白質(zhì)等電點4.7-5.0時,胞漿對外不顯電性,此時酸或堿性染料不易染色。當pH調(diào)到6.7-6.8時,大于蛋白質(zhì)的等電點pH值,表現(xiàn)酸性電離,而帶負電荷的陰離子,可被帶正電荷的染料染我以,現(xiàn)時胞核也被染色,核和胞漿難以區(qū)分。因此必須把 pH調(diào)至胞漿等電點以下,在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷(陽離子),就可被帶負電荷(陰離子)的染料染色。伊紅Y是一種化學合成的酸性染料,在水中離解成帶負電荷的陰離子,與蛋白質(zhì)的氨基正電荷(陽離子)結合而使細胞漿染色,細胞漿、紅細胞、肌肉、結締組織,嗜伊紅顆料等被感染成不同程度的紅色或粉紅色,與藍色的細胞核形成鮮明的對比。

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